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細菌蛋白提取試劑盒

細菌蛋白提取試劑盒

產品編號:RTD8101

產品規(guī)格:100次

數量
價格 ¥400

細菌蛋白提取試劑盒(100次)  貨號:RTD8101

產品組份及規(guī)格

產品編號

名稱

規(guī)格

貯存

運輸

RTD8101-01

細菌蛋白提取緩沖液

100 ml

4

常溫

PM1790

100 mM PMSF100×

10 ml

RT

(配制后-20℃

常溫

RTD8101-03

溶菌酶(50mg/ml

1 ml

-20℃

濕冰

RTD8101-04

DNase I1000U/ml

100 μl

-20℃

濕冰

產品簡介

細菌蛋白提取試劑盒使用溫和的非離子型去污劑,適用于大腸桿菌表達的重組蛋白提取。提取過程中不需進行超聲破碎等復雜的操作步驟,有效避免了外源蛋白的污染。該試劑盒在抽提試劑的基礎上添加了溶菌酶、DNaseⅠ和蛋白酶抑制劑PMSF,可提高蛋白提取效率并減輕因DNA引起的粘稠現象,有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物學活性,可進行IP、Western blot實驗;提取體系中不含EDTA,可直接通過Ni-NTA 等純化填料進行蛋白純化。該試劑盒既可適用于小量蛋白表達檢測,也適用于大量蛋白的表達純化試驗。

每次提取使用1ml 緩沖液計算,該試劑盒可以使用100次。

●    貯存條件:

試劑組份按照溫度貯存,可保存 12個月。

●    使用方法:

1. 8,000 rpm常溫離心 3 min 后,棄上清,盡量棄除殘余培養(yǎng)基,留取管底部菌體。

2. 即用型提取緩沖液配制:每ml 提取緩沖液中加入10 μl PMSF,10 μl 溶菌酶,1 μl DNase I,混勻后4℃貯存?zhèn)溆谩?b>注:該緩沖液現用現配,不建議貯存。

3. 按照原菌液1/2-1/5體積加入即用型提取緩沖液,即2-5 ml菌液收集的菌體加入1 ml 提取緩沖液,用吸頭吹打至無可見細胞團塊,重懸菌體。

4. 20-37孵育 15-20 min,期間輕彈離心管數次以加速裂解。

注:若蛋白表達量較低,建議結合超聲破碎,置冰上后,采用300w,10s 超聲/10s 間隔,超聲20min,至菌液變清亮。

5. 裂解完成后 13,000rpm4℃離心5 min,將上清(上清中即為可溶性蛋白)轉移至新的離心管中,直接進行下一步純化或檢測實驗。

6. 蛋白提取物分裝后建議-80℃保存。

實驗示例:


 
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